目前人類已發(fā)現(xiàn)44種血型系統(tǒng),但在臨床工作中ABO血型系統(tǒng)的臨床意義最為重要,所以對ABO血型進行準確檢測才能保證臨床輸血的有效性和安全性。血清學方法的血型鑒定一般分為正定型和反定型兩種鑒定方式。正定型是用已知抗體的標準血清檢測紅細胞表面的未知抗原,反定型是用已知血型的標準紅細胞檢測血清中的未知抗體,兩種鑒定結(jié)果可以相互驗證,使血型結(jié)果更為準確。
某次,市人民醫(yī)院輸血科兩名工作人員正在核對血型,突然發(fā)現(xiàn)一位耳鼻喉科的患者正定型為B,反定型為O。發(fā)現(xiàn)血型正反定不符,這迅速引起了兩位工作人員的高度警覺,對患者的血液重復實驗后仍是正反不符的情況,正反定一體卡正定B3+、反定抗A4+、反定抗B3+,后進行實驗排除患者冷凝和自凝,不規(guī)則抗體篩查與鹽水抗體篩查均為陰性。后因血清學方法的局限性無法判定患者血型,隨即主動聯(lián)系了省內(nèi)幾家可接待外來標本的相關(guān)機構(gòu)進行基因檢測,最終判定為B型。
那么有哪些原因造成正反定不符的情況呢?
1.血漿中抗體減弱或缺失:白血病、腫瘤、免疫球蛋白水平降低等患者抗體減弱,老年人抗體水平生理性下降,嬰幼兒尚未產(chǎn)生抗體或抗體效價低,均影響反定型的鑒定。可通過加大患者血漿用量的方法進行鑒定。
2.紅細胞抗原減弱:最常見的是白血病、惡性腫瘤等,抗原減弱或消失,干擾正定型,凝集減弱或消失,可加大患者紅細胞濃度或進行吸收放散實驗以確定抗原。
3.不規(guī)則抗體:這一類抗體存在于患者血清中,可在反定型中與標準紅細胞上的相應抗原發(fā)生凝集(而與A或B抗原無關(guān)),導致正反不一致。抗體篩選試驗陽性,應用譜細胞可鑒定出不規(guī)則抗體種類。
4.自身免疫性溶血性貧血:患者紅細胞表面存在致敏自身抗體,DAT(直接抗人球蛋白試驗)陽性,有時正定型會發(fā)生非特異性凝集。同時血清中存在的自身抗體也能干擾反定型??捎?7℃生理鹽水洗滌患者紅細胞,一般可排除干擾。
5.冷凝集素:高效價冷凝集素在體外4℃或室溫條件下可與自身紅細胞發(fā)生非特異性凝集反應,可出現(xiàn)正反定型全凝集的現(xiàn)象。用37℃生理鹽水洗滌紅細胞,去除紅細胞表面附著的冷凝集素,可獲得可靠地正定型結(jié)果。37℃溫浴患者標本,可消除血漿中游離的冷凝集素對反定型的影響。
6.亞型:由遺傳因素導致,即紅細胞A或B抗原弱化,正定型抗A或抗B有時不能檢測出抗原而不出現(xiàn)凝集,造成定型困難。進一步鑒定需正定型增加抗-H、抗-A1、抗-AB,反定型增加O細胞、A1細胞、A2細胞,還應進行吸收放散試驗、唾液中血型物質(zhì)檢測等。
7.血漿成分異常:多發(fā)性骨髓瘤患者易使紅細胞發(fā)生緡錢狀凝集,在血清中加入1-3滴生理鹽水凝集可消失(真凝集不受影響)。某些藥物主要為血漿擴容劑如右旋糖酐、聚維酮、羥乙基淀粉等,易使紅細胞發(fā)生緡錢狀凝集。
8.造血干細胞移植:血液病患者進行ABO血型不同的異基因外周血干細胞移植后,受者原有血型的紅細胞不斷衰亡,最終被供者血型的紅細胞取代之,患者原有的同種凝集素在移植后逐漸消失,供者的干細胞在受者體內(nèi)存活時,患者紅細胞上的血型變?yōu)榕c供者的血型一致,但血清中并沒有產(chǎn)生對應的抗體,會造成正反定型不一致。
正確鑒定病人的ABO血型是臨床輸血工作的重要任務,尤其是在出現(xiàn)正反定不符的情況時,能夠準確地判斷患者血型,才能有效保證輸血安全。